天津大學(xué)團隊研發(fā)出發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒檢測新方法

中國教育報-中國教育新聞網(wǎng)訊（記者 陳欣然 通訊員 張華）近日，天津大學(xué)醫(yī)學(xué)部生命科學(xué)學(xué)院、天津大學(xué)合成生物技術(shù)國家重點實驗室的王濤教授團隊研究出一種“時序溫控”的檢測新方法，為發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒的快速診斷提供了高靈敏度、低成本的新方案。研究成果在線發(fā)表在國際期刊《傳感器與執(zhí)行器B：化學(xué)》上。

發(fā)熱伴血小板減少綜合征，是一種由蜱蟲傳播的病毒引起的傳染病，重癥致死率達30%。由于沒有特效藥，也缺少快速檢測的辦法，它被世界衛(wèi)生組織列為十大亟需關(guān)注的傳染病之一。所以，能否盡早發(fā)現(xiàn)這種病毒，對防控特別關(guān)鍵。

在對發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒的傳統(tǒng)檢測中，Cas12b蛋白就像“帶導(dǎo)航的剪刀”，先靠其特定引導(dǎo)RNA找到發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒的專屬基因，一旦精準(zhǔn)匹配，就會激活“剪刀”功能，不僅切斷病毒基因，還會順帶切碎反應(yīng)體系里的其他核酸探針，從而釋放出熒光信號，通過捕捉熒光信號，就知道樣本里有該病毒了。

該研究把對發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒的擴增與檢測“整合”在了一個試管里，通過時序調(diào)節(jié)溫度變化控制檢測流程，實現(xiàn)對發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒的靈敏高效識別。利用Cas12b蛋白在低溫下酶活受抑的特性，當(dāng)把溫度控制在37℃的時候，可以讓病毒的核酸快速復(fù)制擴增，確保檢測的超靈敏性；隨后把溫度調(diào)到60℃，激活Cas12b蛋白，完成病毒的識別。通過控制溫度變化，實現(xiàn)了檢測流程的自動切換，既避免了傳統(tǒng)兩步法中移液導(dǎo)致的污染風(fēng)險，又無需額外的化學(xué)改造及復(fù)雜調(diào)控。

通過對各種反應(yīng)參數(shù)的系統(tǒng)優(yōu)化，該研究成果顯著提升了檢測靈敏度和體系穩(wěn)定性，整個檢測流程僅需45分鐘即可獲得結(jié)果。新檢測方法的檢測結(jié)果還可在藍光照射下直接通過肉眼觀察區(qū)分陽性與陰性樣本，展現(xiàn)出優(yōu)異的現(xiàn)場可操作性和直觀可視化特征。

團隊還用52份臨床血清樣本對該檢測方法進行了驗證，結(jié)果顯示，該檢測方法的檢測結(jié)果與目前常用的熒光定量檢測方法的檢測結(jié)果完全一致，準(zhǔn)確率100%。新檢測體系可以采用凍干預(yù)混保存策略，穩(wěn)定性高，運輸和儲存都很方便，可廣泛應(yīng)用于基層醫(yī)療、口岸檢疫、疫情應(yīng)急監(jiān)測等場景。

該研究成果不僅為發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒的快速檢測提供了新思路，也為CRISPR分子診斷平臺的溫度調(diào)控設(shè)計提供了新的范式。未來，該體系有望擴展至多種病原體的快速檢測與現(xiàn)場監(jiān)測中，為傳染病的早期防控提供重要支撐。